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低速離心機制備細胞膜試驗步驟

  • 發(fā)布日期:2015-09-15      瀏覽次數(shù):2859
    •  低速離心機廣泛適用于樣品量少、步驟多、離心力大、溫度要求不高的實驗。如:生物化學(xué)、遺傳工程、農(nóng)林學(xué)科、食品衛(wèi)生、醫(yī)院和其它科研單位實驗室對樣品的分離。
        低速離心機產(chǎn)品特點:
        1、TFT真彩大屏幕觸控液晶顯示,智能化控制,可觸摸/按鍵兩種操作模式同時控制。
        2、采用大力矩?zé)o刷變頻電機驅(qū)動,特殊組合減震裝置,使電機平穩(wěn)運行。
        3、運行參數(shù)自動記錄,可RCF直接啟動。
        4、設(shè)有三層鋼套保護、運行安全可靠。
        5、可提供20種工作模式選擇,可自由編程、調(diào)用。
        6、點動功能,短暫離心。
        7、10檔加速/減速速率控制
        低速離心機制備細胞膜的分離實驗:
        試劑:生理鹽水,0.25mol/L 蔗糖溶液(含0.3mol/LCacl2),0.34mol/L 蔗糖溶液(含0.3mol/LCacl2);器件:常規(guī)的分離細胞膜的。
        1)取空腹12h雄鼠(150g),斷頭處死,放血。解剖取肝臟,迅速用生理鹽水洗凈,用濾紙吸干。取3g肝臟剪碎,經(jīng)冷的0.25mol/L 蔗糖溶液洗滌數(shù)次,加18ml預(yù)冷0.25mol/L 蔗糖溶液勻漿,用雙層尼龍膜過濾,備用。
        2)將勻漿的放入離心管中,沿壁小心加入等體積的0.34mol/L 蔗糖溶液覆蓋于樣品上,以700g離心10min.
        3)將離心沉淀以0.25mol/L 蔗糖溶液洗滌, 1000g(3500r/min)離心10min,重復(fù)一次。
        4)離心后沉淀為細胞核,其上有一較疏松的上層,小心吸出此上層,懸于密度d20為1.16的蔗糖溶液(51g/L)中,移入離心管,沿壁加密度d20為1.18的蔗糖溶液(51.5g),覆蓋在樣品層上層。700g(3000r/min)離心10min,細胞膜組分位于兩層溶液界面,小心吸出,置低溫保存,以備進一步分析。